Melihat Morfologi Sel Mycobacterium tuberculosis

Koch menggunakan pewarnaan untuk melihat morfologi sel M. tuberculosis. Ini dapat dilihat melalui pengecatan Ziehl-Neelsen. Hal ini dikarenakan Mtb adalah Basil Tahan Asam (BTA) yang hanya dapat diwarnai dengan pewarnaan tertentu. Pewarnaan Ziehl-Neelsen pada bakteri ini di bawah mikroskop cahaya akan terlihat basil bentuk panjang sedikit bengkok dan berwarna merah dengan latar belakang biru.  Bakteri ini tidak tumbuh pada media biasa, namun tumbuh pada media padat yang mengandung telur, biasanya tumbuh lambat dan memerlukan oksigen. Waktu generasi sekitar 14 sampai 15 jam dan koloni muncul antara 2 sampai 6 minggu pada suhu optimum 37_­^oC dan pH optimum 6.4 sampai 7

Strain Mycobacterium tuberculosis

Metode pengecatan Ziehl-Neelsen dipilih karena lebih simple dengan hasil yang cepat dalam mendeteksi adanya BTA pada isolat klinis. Walaupun merupakan teknik kuat dan agak murah menghasilkan spesifikasi yang bisa diterima, teknik ini juga punya kelemahan dalan sensitivitas berkisar 22 – 78% dan memerlukan paling sedikit 5 x 10³ basil per mil sputum. Walaupun demikian, tetap digunakan. Bisa jadi inilah alasan jika seseorang memeriksa sputum butuh beberapa hari agar hasil tesnya keluar.

#lookingfromthelifescience

Pewarnaan Ziehl-Neelson (ZN)

TB Day atau Hari TB sedunia di peringati setiap tanggal 24 Maret
Tanggal ini ditetapkan karena merupakan hari M. tuberculosis diperkenalkan sebagai agen penyebab TB oleh Robert Koch tahun 1882.
Oleh karenanya, jika mendengar istilah Basillus Koch atau Tubercle Koch artinya mengarah ke M. tuberculosis.
Isolasi kuman Mycobacterium pertama dilakukan oleh Hansen (1874), yaitu jenis M. leprae yang merupakan agen penyebab penyakit lepra/ leprosy. Penyakit ini dikenal juga dengan istilah Hansen Disease sedangkan agen penyebabnya disebut juga Basillus Hansen / Leprosy Basillus.
Sedangkan isolasi kuman M. tuberculosis dilakukan oleh Robert Koch (1882) yang dikenal juga dengan Tuberkel Basillus.

Sejarah Singkat pewarnaannya
Koch menemukan M. tuberculosis menggunakan Methylen Blue (MB) dalam pewarnaannya. MB ini pertama kali diperkenalkan oleh Ehrlich tahun 1881.
Metode Koch dalam mewarnai kuman TB ini dimodifikasi oleh Ehrlich (1887) dan dipakai sebagai dasar teknik pewarnaan Ziehl-Neelsen yang masih digunakan sampai saat ini sebagai metode pewarnaan yang lumayan murah dengan hasil yang baik.

• Modifikasi metode Ehrlich oleh Ziehl adalah penggunaan asam karbolik menggantikan aniline-water
• Modifikasi Neelson yaitu memperkenalkan asam sulfurik menggantikan asam nitrik

Artinya disebut pewarnaan Ziehl-Neelson karena di modifikasi.

Prinsip dari pewarnaan ini adalah menyebabkan pori-pori lipid pada bakteri akan melebur sehingga zat warna dapat masuk ke dalam tubuh kuman. 

Bila preparat dingin, zat warna tidak dapat terlepas walaupun dipengaruhi asam (disebut Bakteri Tahan Asam (BTA)

Jika BTA positif, bakteri berwarna merah

Jika BTA negatif, bakteri berwarna biru

*pada pewarnaan ZN

#lookingfromthelifescience

Koloni Mycobacterium tuberculosis pada Medium Lowenstein-Jensen (Medium LJ)

Morfologi koloni M. tuberculosis (Mtb) dapat dapat dilihat pada medium Lowenstein-Jensen (Medium LJ). Penampilan koloni Mtb pada medium tersebut yaitu berwarna putih susu, kekuning-kuningan, permukaan rata, kering dan kasar dengan tepi tidak rata serta pertumbuhan tidak lebih dari 4 sampai 8 minggu waktu inkubasi. Temperatur optimal untuk pertumbuhan Mtb adalah 35 – 37 oC 

Morfologi Koloni Mycobacterium tuberculosis pada

Medium Lowenstein-Jensen (Medium LJ).

Medium LJ adalah medium selektif untuk Mycobacterium karena komposisinya terdapat Malachite Green untuk mencegah kontaminan dan mendorong pertumbuhan Mycobacteria, suspense telur yang menyediakan asam lemak dan protein yang dibutuhkan untuk metabolisme Mycobacteria dan ketika dipanaskan albumin telur akan mengental, membentuk permukaan padat sebagai media inokulasi. Selain itu penambahan gliserol akan menguntungkan pertumbuhan basil tuberkel dan tidak bagi basil bovin Mycobacterium bovine. Komposisi lainnya yaitu L-asparagine dan potato flour sebagai sumber nitrogen dan vitamin, kemudian monopotassium phosphate dan magnesium phosphate untuk mempercepat pertumbuhan juga sebagai penyangga pH
#mycobacterium #tuberculosis #TB
#lookingfromthelifescience

Mycobacterium Tuberculosis Complex (MTC)

Klasifikasi Bakteri

Domain : Bacteria
Phylum : Actinobacteria
Classis : Actinobacteria
Ordo : Actinomycetales
Familia : Mycobacteriaceae
Genus : Mycobacterium
Species : Mycobacterium tuberculosis complex (MTC) yaitu
  Mycobacterium africanum, Mycobacterium
  bovis, Mycobacterium canettii, Mycobacterium
  microti, Mycobacterium tuberculosis.
Sumber : (Sly, 2018)

Koloni Mycobacterium tuberculosis pembesaran tinggi 15549 X, 2006 Mikroskop Elektron Scanning (SEM)

Disebut MTC dikarenakan 85-100% genetiknya mirip, yang berbeda dari epidemologinya saja, yaitu:
M. tuberculosis adalah penyebab penyakit Tuberkulosis (TB) pada manusia secara umum, sedangkan M. africanum juga penyebab penyakit Tuberkulosis (TB) pada manusia tapi terkhusus di Afrika.
M. bovis juga bisa menjadi penyebab penyakit TB pada manusia, tapi umumnya ditemukan pada hewan baik hewan liar ataupun peliharaan
M. microti adalah penyebab TB pada tikus kecil
M. canettii sebagai jenis yang terakhir di golongkan dalam MTC, yaitu pada tahun 1997. Diberi nama sesuai penemunya yaitu Georges Canettii. Ciri khas dari canettii ini adalah memiliki koloni yang smooth. Awal penemuannya pada babi peliharaan.

#mycobacterium #tuberculosis #TB
#lookingfromthelifescience